Considere as seguintes condições cromatográficas em HPLC: Coluna de sílica, eluente tolueno:diclorometano (70:30, v/v), fluxo de
, detecção em 240 nm .0 cromatograma apresentou 3 picos:
Pico
Pico
Pico
b) Qual seria a ordem de eluição dos compostos se utilizássemos uma coluna C18?
Pico
Pico
Pico
b) Qual seria a ordem de eluição dos compostos se utilizássemos uma coluna C18?
Passo 1
Beleza, vamos lá! O que temos aqui é uma questão de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC). Estamos usando uma coluna de sílica e queremos saber como os compostos vão se comportar se mudarmos para uma coluna C18. Precisamos entender como a mudança da coluna afeta a ordem em que os compostos são eluídos (ou seja, saem da coluna). Para resolver isso, vamos precisar saber um pouco sobre os tipos de colunas usadas em HPLC e como elas interagem com os compostos que estamos analisando.
Passo 2
Primeiro, vamos falar sobre os tipos de colunas. A coluna de sílica que estamos usando inicialmente é considerada uma coluna de fase normal. Isso significa que a sílica é polar, e os compostos se separam com base em suas interações polares. Em colunas de fase normal, geralmente, os compostos menos polares eluem primeiro porque interagem menos com a fase estacionária polar.
Passo 3
Agora, vamos falar sobre a coluna C18. Essa coluna é um tipo de coluna de fase reversa (ou fase apolar). Ela é revestida com cadeias de octadecila (C18), que são bem apolares. Numa coluna de fase reversa, os compostos mais apolares tendem a interagir mais com a fase estacion��ria e, por isso, eluem mais lentamente. Já os compostos mais polares têm menos interação e eluem mais rápido.
Passo 4
Considerando que na coluna de sílica (fase normal) tivemos a seguinte ordem de eluição:
- Pico 1: Rt = 1 min
- Pico 2: Rt = 3 min
- Pico 3: Rt = 5 min
Isso sugere que o Pico 1 é o menos polar e o Pico 3 é o mais polar, já que os menos polares eluem primeiro na fase normal.
Passo 5
Quando trocamos para a coluna C18 (fase reversa), a ordem de eluição se inverte. Ou seja, os compostos que eram menos polares agora interagem mais com a fase estacionária e eluem mais tarde. Assim, os mais polares (que antes eluíam primeiro) agora eluirão primeiro.
Passo 6
Aplicando isso à nossa situação:
- Na coluna C18:
- Pico 3 (mais polar) eluiria primeiro.
- Pico 2 (polar intermediário) eluiria em seguida.
- Pico 1 (menos polar) eluiria por último.
Resposta
Usando uma coluna C18, a ordem de eluição dos compostos seria: Pico 3 primeiro, depois Pico 2 e por último Pico 1.
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(b) ;
(b)
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.