Procedimento Proteína total (mg) Atividade (U)
1. Extrato cru 20000 4000000
2. Precipitação (sal) 5000 3000000
3. Precipitação (pH) 4000 1000000
4. Cromatografia por <br> troca iônica 200 80000
5. Cromatografia por <br> afinidade 55 750000
6. Cromatografia por <br> exclusão de tamanho 40 675000
a) Qual a atividade específica da solução de enzimas após cada processamento de purificação?
Resposta: 1. 200 U/mg, 2. 600 U/mg, 3. 250 U/mg, 4. 400 U/mg, 5. 13636 U/mg, 6. 16875 U/mg

Passo 1

Beleza, vamos começar entendendo o que a questão está pedindo. Temos uma tabela com diferentes etapas de purificação de uma solução de enzimas. Para cada etapa, sabemos a quantidade total de proteína (em mg) e a atividade (em unidades, U). O que precisamos descobrir é a atividade específica após cada etapa. A atividade específica nos mostra quanta atividade temos por miligrama de proteína, o que é útil para avaliar a eficácia de cada etapa de purificação.

Passo 2

Primeiro, vamos lembrar o que é atividade específica. Atividade específica é uma medida que relaciona a atividade enzimática com a quantidade de proteína presente. Ela é calculada usando a seguinte fórmula:
Atividade Específica = Atividade (U)Proteína Total (mg) íí
Essa fórmula nos dá uma ideia de quão “pura” está a nossa enzima em cada etapa de purificação.

Passo 3

Vamos aplicar essa fórmula para cada etapa da tabela fornecida. Vamos calcular a atividade específica dividindo a atividade total pela quantidade de proteína em cada processo.
Etapa 1: Extrato cru
Atividade Específica = 4,000,000, U20,000, mg = 200, U/mg í

Passo 4

Etapa 2: Precipitação (sal)
Atividade Específica = 3,000,000, U5,000, mg = 600, U/mg í

Passo 5

Etapa 3: Precipitação (pH)
Atividade Específica = 1,000,000, U4,000, mg = 250, U/mg í

Passo 6

Etapa 4: Cromatografia por troca iônica
Atividade Específica = 80,000, U200, mg = 400, U/mg í

Passo 7

Etapa 5: Cromatografia por afinidade
Atividade Específica = 750,000, U55, mg approx 13,636, U/mg í

Passo 8

Etapa 6: Cromatografia por exclusão de tamanho
Atividade Específica = 675,000, U40, mg = 16,875, U/mg í

Resposta

A atividade específica da solução de enzimas após cada processamento de purificação é:
  1. 200 U/mg
  2. 600 U/mg
  3. 250 U/mg
  4. 400 U/mg
  5. 13.636 U/mg
  6. 16.875 U/mg

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