Procedimento | Proteína total (mg) | Atividade (U) |
---|---|---|
1. Extrato cru | 20000 | 4000000 |
2. Precipitação (sal) | 5000 | 3000000 |
3. Precipitação (pH) | 4000 | 1000000 |
4. Cromatografia por <br> troca iônica | 200 | 80000 |
5. Cromatografia por <br> afinidade | 55 | 750000 |
6. Cromatografia por <br> exclusão de tamanho | 40 | 675000 |
a) Qual a atividade específica da solução de enzimas após cada processamento de purificação?
Resposta: 1. 200 U/mg, 2. 600 U/mg, 3. 250 U/mg, 4. 400 U/mg, 5. 13636 U/mg, 6. 16875 U/mg
Resposta: 1. 200 U/mg, 2. 600 U/mg, 3. 250 U/mg, 4. 400 U/mg, 5. 13636 U/mg, 6. 16875 U/mg
Passo 1
Beleza, vamos começar entendendo o que a questão está pedindo. Temos uma tabela com diferentes etapas de purificação de uma solução de enzimas. Para cada etapa, sabemos a quantidade total de proteína (em mg) e a atividade (em unidades, U). O que precisamos descobrir é a atividade específica após cada etapa. A atividade específica nos mostra quanta atividade temos por miligrama de proteína, o que é útil para avaliar a eficácia de cada etapa de purificação.
Passo 2
Primeiro, vamos lembrar o que é atividade específica. Atividade específica é uma medida que relaciona a atividade enzimática com a quantidade de proteína presente. Ela é calculada usando a seguinte fórmula:
Essa fórmula nos dá uma ideia de quão “pura” está a nossa enzima em cada etapa de purificação.
Passo 3
Vamos aplicar essa fórmula para cada etapa da tabela fornecida. Vamos calcular a atividade específica dividindo a atividade total pela quantidade de proteína em cada processo.
Etapa 1: Extrato cru
Passo 4
Etapa 2: Precipitação (sal)
Passo 5
Etapa 3: Precipitação (pH)
Passo 6
Etapa 4: Cromatografia por troca iônica
Passo 7
Etapa 5: Cromatografia por afinidade
Passo 8
Etapa 6: Cromatografia por exclusão de tamanho
Resposta
A atividade específica da solução de enzimas após cada processamento de purificação é:
- 200 U/mg
- 600 U/mg
- 250 U/mg
- 400 U/mg
- 13.636 U/mg
- 16.875 U/mg
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